冷胁迫是直接影响农粮食作物出现的重点坏境桃战之六。钙根据性蛋白质激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）网络信号递送到上皮细胞并修改密码对苦难响应的的核心上下调整要素，但其房产调控管理机制尚不很明白。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化修饰语位点检验服务。

国外英文子标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文翻译一级标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

企业客户计量单位：浙江大学

理论研究物料：番茄

拜谱给予技巧：磷硝化作用修饰语位点的检测

学习工作思路：

一、分析没想到

1、CPK27在温度过低胁迫下展现上涨，才能增强学习茎叶耐热性

自始的调查取决于，CPK27在冷胁迫具体条件下形容调涨。为验正上述然而，中心句中写作者施用CPK27的一个敲除转变系（cpk27 #2，#6）开展耐旱性测试方法，会发现CPK27的转录平均水平面重要过于比较组（图1a-b）。在CPK27形容被阻止的苔藓植物中，对耐旱性的激发功效重要衰弱。进一大步的亚神经细胞位置与激发的调查取决于，冷胁迫利于CPK27向神经细胞核积聚，并激发其磷酸性反应平均水平面（图1 f）。免役印记解析进一大步否认冷胁迫引发 CPK27 在核内蛋清丰度增大、胞内丰度提高，外源CaCl₂进行处理可要素医治cpk27的冷特别敏感表型，取决于CPK27依懒Ca²⁺手机信号起着功效。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖感的方式提高番茄耐寒性性

2、CPK27凭借宏观调控黄胺类合成视频行业克服较低温度直接损伤

转录组测序结果显视显视，CPK27的过理解正一些上涨黄胺类微生物获得一些dna遗传，如CHS、CHI和FLS等，并且黄胺类产生信号通路正一些聚集。而CPK27变化体中等dna遗传理解再降，警告CPK27用驱动黄胺类获得有所帮助根系舒缓冷藏胁迫面临的阳极氧化经济压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq解析CPK27政策调控的冷反映dna

3、HY5是CPK27介导的抗寒信息信号通路中的主要靶标

为校验 CPK27 与 HY5 的互相效应，原作者第一步一个脚印完成了酒曲双杂交育种（Y2H）實驗，但是揭示这两种具备互相效应（图3a）。双原子核荧光彼此之间依存（BiFC）實驗提高认识一个脚印揭示CPK27 与 HY5 在内部核内突发互相效应（图 3b）。接下来根据免疫性共奠定等能力，挖掘HY5与CPK27在苔藓植物身体具备互相效应，且这两种的互相效应体现了钙亚铁离子（Ca²⁺）依赖症性（图 3c）。除外，在Co-IP實驗的血清导入前加入的冷胁迫进行处理，但是凸显冷胁迫可提高HY5与CPK27的互相效应（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其关键性位点

4、CPK27磷过酸HY5改善其转录化学活化，力促黄大环内酯遗传基因形容

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化呈现位点检查，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷硝化作用HY5并增加其不稳确定性

5、CPK27 在类黄酮菌物合成图片径路中做用于HY5的长江上游

整体人类基因理解和新陈代谢物分析一下然而（图5），CPK27在冷胁迫相应时中做用于HY5的中下游，确认干预 HY5 介导的类黄酮生物学聚合通道作用绿植的耐冷性。

图5 CPK27功能于HY5中下游

二、文章标题工作小结

综上提出的提出的，从文中钻研展现CPK27磷碱化表达HY5蛋清，更改密码类黄酮人工经由，采取防老化的的化学物质积攒，以致加强耐寒性业务能力。该钻研展现了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联政策调控新机制（图6），否认CPK27介导的HY5磷碱化是相连钙警报与次生消化吸收暴击的要点要素，为理解是什么树木面对困境加载失败数据网络提高了新移动镜头。

图6 CPK27-HY5功能提升 作物耐受力冷胁迫的制度

三、拜谱总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的脂肪酸质组学、表达脂肪酸质组学、代谢转化组学、转录组学等两组学厂品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参照学术论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134